طريقة غسيل كرات الدم الحمراء لعمل اختبار التوافق
طريقة غسيل كرات الدم الحمراء لعمل اختبار التوافق
سنتناول شرح طريقة غسيل كرات الدم الحمراء لإجراء اختبار التوافق قبل نقل الدم حيث يتم بين دم المربض و المتبرع حتي لا تحدث مضاعفات نقل الدم و حتي يكون نقل الدم أمان و سليم .
أولا : التحضير :-
1- يتم سحب عينة دم من المريض كافيه علي أن تكون في مانع تجلط مثل EDTA.
2- يتم تحضير ملح فسيولوجي معمليا : 9 جم من كلوريد الصوديوم في لتر ماء مقطر . ( قديما )
أما الآن فالمحلول الملح تركيز 9% يكون معد جاهز طبيا .
* طريقة غسيل كرات الدم الحمراء RBCs:
1- يتم وضع 4 مل من محاول الملح 9 % علي أنبوبة الدم ( دم المريض )
2- ترج جيدا ثم توضع في جهاز السنترفيوج و تدار علي 2000 لفه / دقيقتين .
3- ثم يتم سكب السائل الرايق بواسطو الميكروبت أو ماصة باستر .
4- ثم تعاد التجربة من 3 - 4 مرات علي سوف الطريقة 2000لفة / دقيقتين و يتم إزالة السائل الرايق حتي تبقا كرات الدم الحمراء RBCs
* يتم عمل محلول معلق لكرات الدم الحمراء بتركيزات مختلفة علي سيبل المثال :
1- تركيز 2% : 9.8 مل من محلول الملح علي 200 ميكرو دم مغسول ( السابق تحضيره في الخطوة السابقة ).
2- تركيز 3% : 9.7 مل من محلول الملح علي 300 ميكرو دم مغسول .
3- تركيز 5 % : 9.5 مل من محلول الملح علي 500 ميكرو دم مغسول.
* طريقة إجراء اختبار التوافق Cross matching :
قبل البدء في عمل اختبار التوافق بين دم المعطي و المستقبل يتم عمل اختبار فصيلة الدم ABO و عامل ريسيس RH لتأكد من تطابق الدم .
و ينقسم التوافق إلي نوعين :-
1- التوافق الأكبر : حيث يكون بين سيرم المريض و كرات الدم الحمراء للمتبرع .
2- التوافق الأصغر : حيث يكون بين سيرم المتبرع و كرات الدم الحمراء للمريض .
أولا: شرح طريقة التوافق الأكبر :
- لابد من تطابق فصيلة المتبرع مع فصلية المريض ABO و عامل ريسيس RH.
- يتم سحي عينة دم كافيه من المريض للحصول علي السيرم .
- يتم عمل معلق من كرات الدم الحمراء للمتبرع بتركيز 2% .
الطريقة :
1- نحضر أنبوبتين 1 & 2 و نصع في كلا منهم نقطتين من معلق كرات الدم الحمراء للمتبرع 2 % .
2- يتم وضع نقطتين من سيرم المريض في الأنبوبتين .
3- نضع في الأنبوبة رقم 2 نقطتين من زلال حيواني بقري لأنه حساس لأي أجسام مضادة كاملة او غير كاملة .
التحصين :
1- نضع الأنبوبية رقم 1 في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة .
2- نضع الأنبوبة رقم 2 في حمام مائي 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة .
3- تضع كلا الأنبوبتين في جهاز السنترفيوج و تدار علي سرعة بطيئة 2000 لفة / دقيقتين .
النتيجة :
يتم فحص كلا من الأنبوبتين :
1- اذا حدث تلز ن ( تجلط ) في الأنبوبتين أو احدهما غير صالح للاستخدام ( بمعني أن الدم غير متوافق ) فانه غير صالح لنقله إلي المريض و يتم أجراء الاختبار علي متبرع أخر .
2- اذا لم يحدث أي تلزن أو تجلط في أي من الأنبوبتين فانه صالح للاستخدام ( بمعني أن الدم متوافق ) و صالح لنقل إلي المريض .
ملحوظة : يوجد طريقة أخري لإجراء هذا التوافق الأكبر :-
* نضع نقطتين من سيرم المريض ( المستقبل ) مع نقطة من كرات الدم الحمراء للمتبرع ( المعطي ) في أنبوبة وزرمان و تغلق الأنبوبة لمنع التبخر ثم توضع في حمام مائي 37 درجة مئوية ، لمدة 20 دقيقة .
* يتم وضع نقطة من أنبوبة وزمان علي شريحة و تفحص بالعين المجردة و الميكروسكوب للتأكد من وجود تلزن ( تجلط ) من عدمه .
- في حالة وجود تلز ن ( تجلط ) يكون الدم غير متوافق و غير صالح لنقله إلي المريض .
- في حالة عدم وجود أي تلزن ( تجلط ) فان الدم متوافق و صالح لنقل إلي المريض .
* اختبار التوافق الأصغر علي نفس نمط التوافق الأكبر.